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瓊脂糖凝膠電泳涉及的步驟
  • 發布日期:2021-05-11     信息來源:      瀏覽次數:288
    • 那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下關于瓊脂糖凝膠電泳涉及的步驟:

       為了制備凝膠,將瓊脂糖粉與電泳緩沖液混合至所需濃度,并在微波爐中加熱使其熔化。

      瓊脂糖凝膠濃度

      1. 所用瓊脂糖的百分比取決于要分離的片段的大小。

      2. 瓊脂糖的濃度是指瓊脂糖相對于緩沖液體積的百分比(w / v),瓊脂糖凝膠通常在0.2%至3%的范圍內。

      3. 瓊脂糖濃度越低,DNA片段遷移越快。

      4. 通常,如果目的是分離大的DNA片段,則應使用低濃度的瓊脂糖,如果目的是分離小的DNA片段,則建議使用高濃度的瓊脂糖。

      將溴化乙錠添加到凝膠中(**終濃度為0.5 ug / ml),以促進電泳后DNA的可視化。

      將溶液冷卻至約60°C后,將其倒入裝有樣品梳子的澆鑄盤中,使其在室溫下固化。

      凝膠固化后,將梳子移開,注意不要撕裂孔的底部。

      仍在塑料托盤中的凝膠水平插入電泳儀并用緩沖液覆蓋。

      然后將含有DNA與上樣緩沖液混合的樣品吸移到樣品孔中,將蓋子和電源線放在設備上,并施加電流。

      可以通過觀察電極上的氣泡確認電流。

      鑒于其負電荷,DNA將遷移至通常為紅色的正電極。

      . DNA遷移到凝膠中的距離可以通過肉眼監測跟蹤染料(如溴酚藍和二甲苯氰染料)的遷移來判斷。

       

      以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結關于瓊脂糖凝膠電泳涉及的步驟。

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